产品货号：
HR0123
中文名称：
石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
英文名称：
Paraffin embedded tissue protein extraction kit
产品规格：
50T|100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本产品适用于从各种石蜡包埋的组织样本中提取总蛋白，提取过程简单方便，提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
保存：室温，有效期1年。
离心机、振荡器、涡旋混匀器、恒温器/水浴锅、移液器、二甲苯、梯度乙醇、蒸馏水、蛋白定量试剂盒
相关搜索：石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒，FFPE蛋白提取试剂盒，Paraffin embedded tissue protein extraction kit
| 组分 | 50T | 100T |
| 组分A：蛋白提取液A | 25mL | 50mL |
| 组分B：蛋白提取液B | 250μL | 500μL |
保存：室温，有效期1年。
离心机、振荡器、涡旋混匀器、恒温器/水浴锅、移液器、二甲苯、梯度乙醇、蒸馏水、蛋白定量试剂盒
- 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
- 注意低丰度蛋白的检测方法。
- 提取液制备：每500μL蛋白提取液A中加入5μL蛋白提取液B，混匀后备用。
- 样本常规脱蜡，然后用流水冲洗30分钟。
注：没有流水冲洗条件可以多次换水。 - 将样本用手术剪刀尽可能剪碎，每100mg样本中加入300～500μL蛋白提取液，涡旋振荡10秒。
注：
● 样本较小时直接加入蛋白提取液。根据样本大小按比例减少提取液用量。
● 固定过的组织样品蛋白回收率大幅降低，条件允许的情况下尽可能加大组织上样量。
● 有匀浆条件的话，组织加入蛋白提取液后进行充分匀浆。 - 在37℃条件下振荡1小时。
注：
● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
● 没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。 - 在恒温器或水浴锅中100℃保温10分钟。
- 涡旋振荡10秒混匀。
- 在恒温器或水浴锅中60℃保温1小时。
注：中途每20分钟用移液器吹打混匀。 - 涡旋振荡10秒混匀。
- 在12000×g条件下离心10分钟。
- 将上清吸入另一干净离心管，即可得到总蛋白。
- 将上述蛋白提取物定量后分装保存备用或直接用于下游实验。
注：
● 组织量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，大约组织体积的3～5倍即可，请根据实际情况调整。
● 建议用BCA法进行蛋白定量。
- 蛋白浓度低？
固定组织的蛋白质回收率在30%左右。
需要加大组织上样量，调整提取液用量来调整蛋白浓度。 - WB做不出来？
固定组织的蛋白质回收率较低，一般在30%左右。低丰度蛋白通常较难检出。
甲醛固定的蛋白质末端基团与甲醛之间形成交联链，各种氨基，亚氨基及酰胺基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环等都会参与甲醛固定蛋白质的基团反应，在这个过程中，绝大部分常规的暴露抗原决定基团遭到破坏，通常从甲醛固定石蜡包埋的样本回收的蛋白质做WB成功的概率较低，最好选用抗体说明书上同时可以做WB和IHC应用的抗体。
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